АТФ люминометрия

Метод АТФ-люминометрии — это быстрый биохимический метод оценки биологической загрязнённости поверхностей, воды или оборудования по количеству аденозинтрифосфата (АТФ), содержащегося в живых клетках и органических остатках.

Суть метода:
- АТФ реагирует с ферментами люциферазой и люциферином, в результате чего возникает свечение (люминесценция).
- Интенсивность света прямо пропорциональна количеству АТФ, а значит — уровню загрязнения.
- Результат измеряется в относительных световых единицах (RLU).

Что показывает АТФ-люминометрия
- наличие микроорганизмов
- остатки пищевых продуктов
- биологические жидкости (кровь, слюна и др.)
- органические загрязнения после недостаточной уборки
^*Метод не различает живые и мёртвые микроорганизмы и не определяет вид бактерий.

Быстрые методы гигиенического мониторинга

Микробиология в реальном времени. Результат через 6-30 часов
ПЦР в реальном времени. Результат через 1,5 часа
АТФ-люминометрия. Результат через 15 секунд

Традиционные методы диагностики органического и микробного загрязнения имеют существенные недостатки по сравнению с методом АТФ-люминометрии.

Недостатки традиционной микробиологии

Необходимость наличия оснащенной микробиологической лаборатории для проведения анализов
Необходимость наличия персонала квалифицированных микробиологов
Значительная продолжительность анализа (несколько дней)
Невозможность оперативной корректировки сан. обработок
Высокая себестоимость и трудоемкость и анализа

Области применения АТФ-люминометрии

Пищевое, косметическое, фармацевтическое, радиоэлектронное производство, общественное питание: экспресс-анализ чистоты оборудования, тары, посуды, рук персонала.
Медицина: экспресс-контроль стерильности медоборудования (эндоскопы), рук персонала.
Экология: экспресс-контроль стерильности особо-чистых помещений, контроль микробных загрязнений воды.
Технология: экспресс-контроль микробных загрязнений технологических жидкостей (СОЖ и др.).

Метод АТФ-люминометрии

В основе работы люминометра лежит метод, основанный на люминометрическом определении количества внутриклеточного АТФ (аденозинтрифосфата). Он относится к скрининговым методам, позволяющим быстро и безопасно выявлять потенциально опасные биологические риски.

АТФ(аденозинтрифосфат) — это универсальная энергетическая молекула, находящаяся во всех растительных, животных и бактериальных клетках, в том числе дрожжах и плесени.

Для анализа используется биохимическая реакция фермента люциферина/люциферазы с молекулами АТФ. Фермент находится в стерильной пробирке, предназначенной для взятия пробы на загрязнения с твёрдых поверхностей или воды. Когда молекулы АТФ вступают в контакт с люциферин/люцифераза реагентом, происходит образование квантов света.

Люминометр считает объём образовавшегося света и в течение 15 секунд выводит на дисплей информацию об уровне загрязнения. Чем выше показания - тем выше уровень загрязнения. Концентрация АТФ напрямую зависит от степени микробной обсеменённости и органического загрязнения. Если речь идёт об отмытых поверхностях, то концентрация АТФ отражает величину общего микробного числа (ОМЧ), а значит — свидетельствует об уровне гигиены.

Уровень АТФ измеряется в относительных световых единицах — RLU. Одной единице RLU соответствует 1 фемтомолю (10-15 моля) АТФ. Такое количество внутриклеточного АТФ содержится в нескольких микробных клетках, что эквивалентно единичным КОЕ на питательной среде.

Этапы проведения

Отбор пробы с поверхности с помощью стерильного тампона
Активация реагента (люциферин-люцифераза)
Помещение тампона в люминометр
Измерение уровня свечения (10–15 секунд)
Сравнение с допустимыми нормативами